La figure ci-dessus montre les résultats d'une cinétique El normale et de l'enzyme mutée E2. E2 ne diffère d'EI que par la substitution d'un radical valyle par un autre acide aminé. 1-Commenter l'affinité d'E1 et E2 pour S 2- Une électrophorèse à PH 7 montre qu'E2 migre rapidement vers l'anode. Quels acides aminés ont pu remplacés la valine dans la séquence de l'enzyme mutée ? Exercice 2 Soit une enzyme à cinétique Michaelienne ; tracer sur un même schéma, l'allure générale des autres courbes V=f(S) a- En absence d'inhibiteur b- En présence d'un inhibiteur compétitif c- En présence d'un inhibiteur non compétitif d- Préciser clairement sur le schéma K_(M) et V_(m)

## Analyse de la cinétique enzymatique et types d'inhibition<br /><br />**Exercice 1:**<br /><br />1. **Comparaison de l'affinité d'E1 et E2 pour S:** Pour commenter l'affinité, il faut analyser le graphique (absent dans la question). On cherche généralement le Km (constante de Michaelis-Menten). **Plus le Km est faible, plus l'affinité de l'enzyme pour le substrat est forte.** Si le graphique représente la vitesse initiale (V0) en fonction de la concentration en substrat [S], le Km correspond à la concentration en substrat pour laquelle la vitesse initiale est égale à la moitié de la vitesse maximale (Vmax/2). Donc, en comparant les Km d'E1 et E2 sur le graphique, on peut déterminer quelle enzyme a la plus grande affinité pour le substrat S. Par exemple, si Km(E1) < Km(E2), alors E1 a une plus grande affinité pour S que E2.<br /><br />2. **Substitution de la valine et migration vers l'anode:** La valine est un acide aminé hydrophobe et non chargé. Si E2 migre rapidement vers l'anode (pôle positif) à pH 7, cela signifie que l'acide aminé qui a remplacé la valine est chargé **positivement** à ce pH. Parmi les acides aminés chargés positivement à pH 7, on peut citer : **la lysine, l'arginine et l'histidine.** La substitution de la valine par un de ces acides aminés conférerait une charge positive à l'enzyme mutée, expliquant sa migration vers l'anode.<br /><br /><br />**Exercice 2:**<br /><br />**Cinétique Michaelienne et types d'inhibition:**<br /><br />Voici comment tracer les courbes V=f(S) :<br /><br />**(a) Absence d'inhibiteur:** La courbe est une hyperbole qui tend asymptotiquement vers Vmax. Km est la concentration en substrat [S] correspondant à Vmax/2.<br /><br />**(b) Inhibiteur compétitif:** La courbe a la même Vmax que l'enzyme sans inhibiteur, mais le Km apparent est plus élevé. L'inhibiteur compétitif se lie au site actif de l'enzyme, empêchant le substrat de se lier. Une concentration plus élevée en substrat est nécessaire pour atteindre la même vitesse qu'en absence d'inhibiteur.<br /><br />**(c) Inhibiteur non compétitif:** La Vmax est diminuée en présence de l'inhibiteur non compétitif, mais le Km reste inchangé. L'inhibiteur se lie à un site différent du site actif, modifiant la conformation de l'enzyme et réduisant son activité.<br /><br />**(Schéma):**<br /><br />Il est difficile de dessiner un schéma ici. Cependant, je peux vous décrire les éléments clés :<br /><br />* **Axe des abscisses:** Concentration en substrat [S]<br />* **Axe des ordonnées:** Vitesse initiale (V0)<br />* **Courbe (a):** Hyperbole classique atteignant Vmax. Indiquer Km à Vmax/2.<br />* **Courbe (b):** Hyperbole atteignant la même Vmax que (a), mais avec un Km apparent plus élevé (décalée vers la droite).<br />* **Courbe (c):** Hyperbole n'atteignant pas la même Vmax que (a) (Vmax plus basse), mais avec le même Km.<br /><br />**Légende:** Indiquer clairement sur le schéma les courbes (a), (b) et (c) ainsi que les valeurs de Km et Vmax pour chaque cas. Pour la courbe (b), préciser qu'il s'agit du Km apparent.<br /><br /><br />J'espère que ces explications vous seront utiles. N'hésitez pas à me poser d'autres questions si besoin.<br />